酶解法是 ACE 抑制肽的常見提取方法,目前多數(shù) 采用單酶水解的方式,但得到的 ACE 抑制肽的抑制效 果有限,復(fù)合酶作用于蝦類蛋白能夠有助于提高水解 產(chǎn)物的抑制活性。以南美白對(duì)蝦蝦頭為原料,取動(dòng)、植 物和微生物來源的共 11 種蛋白酶進(jìn)行單酶及復(fù)合酶 篩選,以水解度和 ACE 抑制率作為測(cè)定指標(biāo)。電熱恒溫鼓風(fēng)干燥 箱(DHG‐9023A):上海齊欣科學(xué)儀器有限公司;脂肪測(cè) 定儀(SZF‐06A):青島精誠(chéng)儀器儀表有限公司;紫外‐可 見分光光度計(jì)(SH‐6600):江蘇盛奧華環(huán)保科技有限 公司。
在相同酶活的條件下,酶解產(chǎn)物 ACE 抑制率的差異可能是由于不同蛋白酶具有不同 的特異性,水解出的肽段活性位點(diǎn)不同而造成的。以黃斑海蜇為原料,經(jīng)胰蛋白酶水解后所得的酶 解產(chǎn)物 ACE 抑制活性最強(qiáng)。而水解度的差異取決于 酶切位點(diǎn)和蝦頭底物的結(jié)合能力,也會(huì)依據(jù)各蛋白酶 最適水解條件不同,受到溫度、酸堿度的影響。綜上, 選取堿性蛋白酶、胰蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、α‐糜蛋白酶 4 種蛋白酶參與復(fù)合酶的篩選。